标本在光学显微镜下观察横断面和纵断面切片

制备标本在光学显微镜下观察横断面和纵断面切片
　　标本制备
　　所有的组织学、组织化学和免疫组织化学研究都可以在冰冻标本上进行。固定和石蜡包埋会破坏纤维的结构，用这些标本不可能进行酶和代谢研究。一些免疫组织化学染色可以用储存的石蜡包埋材料做，这取决于抗体的性质，但进行全套的系列研究非常困难。在光学显微镜下，横断面比纵断面能提供更多的信息。
　　理想的标本处理应在取材后尽快冷冻，尤其是计划要做生物化学研究时，但单纯形态学研究可以用从异地运输来的标本，必要时用轻轻沾湿的纱布包起来，防止干燥，但延误不要超过几个小时。外地运输来的标本因为变性的存在而影响生物化学检查，任何形式的商业化运输方法都一样。从尸体解剖材料可以获得一些有意义的信息，但酶组织化学染　　色几乎不能做。一些蛋白的免疫组织化学染色如肌球蛋白和层粘连蛋白可以在死后的解剖标本中发现，但是肌营养不良素和胞浆膜蛋白在尸体解剖材料不能被检出，主要取决于标本从患者死亡到冷冻的时问长短。
　　将标本直接浸入液氮中会产生气态氮包裹在标本周围，从而延缓标本冷冻的过程。更快冷冻过程和更好的保存组织结构的方法是放人在液氮中预冷至一160 9C的异戊烷中进行冷冻。先将异戊烷装在容器内，而后浸人液氮中，直至完全成为固态，而后复温到固态和液态并存的温度点。
　　我们通常在标有标本名称的软塞上进行标本固定，这样标本容易从恒冷切片机的夹头上取下并易于保存。标本放在软塞上，在标本的基底部周围放上OCT固定剂。然后，将带标本的软塞放进处于液态的异戊烷中。降温时间长短必须根据经验，部分依赖于标本的大小，通常10～20秒就够了。时间太短，会引起肌纤维内形成冰晶的假象，而时间过长易导致标本碎裂。冷冻的组织块在准备切片以前储存在一40℃或更低的温度条件下。长期储存标本最好放在液氮内，避免停电造成损失。切片前，软塞用OCT冻在切片机的标本托上。切片后，