细胞免疫检测实验荧光显微镜技术简介

细胞免疫检测实验荧光显微镜技术简介
无细胞和细胞的体外模型系统的应用使细胞周期研究最近取得了长足的进展。另一方面，它们和原位(即在组织和器官中)状态的关系，对更好地理解细胞周期的生物学以及将迄今获得的知识用于临床的初始阶段是至关重要的。
   我们将概述细胞周期蛋白的组织处理和免疫组化染色的某些基本方案。虽然没有在组织切片上对每种蛋白都可以作免疫检测的通用程序，但下述的步骤，以及可能的修改建议，必将可以使研究者设计出一个对任何有兴趣的细胞周期蛋白进行免疫组化分析的程序。    下列特点使得细胞周期蛋白的免疫组化检测特别有吸引力。    ·自然组织环境中细胞蛋白质的检测，没有各种与体外模型必然相关的人工产物。    ·与基于检测细胞／组织的提取物的免疫印迹或核酸分析(仅提供一个组织平均资料)不同，免疫组化更集中于单细胞水平的分析。    ·通过组织切片的免疫染色所获得的信息，包括亚细胞定位、基因的组织或细胞型特异性表达和蛋白质含量的半定量估计
组织准备和储存
    许多细胞周期调节蛋白质是摆动的或不稳定的多肽，因此，快速地处理这些组织(最好在组织切离后数分钟内)，必须保存足以供免疫组化检测的未降解的靶抗原水平。最常用的两种组织保存方法是：    ·将制备冰冻叨片的标本冰冻    ·将制备石蜡切片的标本固定和石蜡包埋    前一过程比较温和，因此更能保存完整的靶抗原表位。后一过程提供更多的组织学细节，标本能长期使用，并代表了档案组织病理学材料常常藉此收集的传统途径。