细菌的孢子是生长在适当琼脂培养基的表面显微镜

细菌的孢子是生长在适当琼脂培养基的表面显微镜

     验菌悬液的制备    给定菌种的细胞孢子的耐热性是随产生孢子培养基的性质和温度而定。～般采用提供适当的条件，以获得产生耐热性最高的孢子。专性厌氧菌的最好孢子通常是在最低的保温培养温度下取得，此时正是处于营养体茁壮生长阶段。对芽孢杆菌属来说，耐热性最高的孢子一般是在最高保温培养温度而取得，此时正是处于营养体茁壮生长阶段。   孢子的产生和收集  孢子良好发芽所需要的营养条件往往与良好营养体生长的营养条件不同，因此，一些培养基可激励营养体良好地生长，但孢子在这些培养基上发芽却很差。   专性需氧菌和兼性厌氧菌  这些细菌的孢子是生长在适当琼脂培养基的表面。下面介绍一种广泛采用的方法。琼脂斜面培养试管用试验菌生长活泼的培养物接种。然后升至适当温度保温培养2～4天。当镜检出现高的成熟孢子时，则从保温培养箱取出斜面培养物并把表面生长物悬浮在无菌水中。为了悬浮生长物，每管要加3毫升的无菌水。同时用无菌接种环把生长物从表面刮下，悬浮于水中。后从许多斜面培养基将培养物收集于无菌的螺旋盖稀释瓶中，而成为悬液。然后将悬液在80℃加热20分钟，以破坏营养细胞，并活化孢子，以促进发芽。这种加热的悬液用于琼脂斜面培养瓶的接种，以供大量生产孢子。    用容量150毫升的螺旋盖瓶作为斜面培养瓶是较方便的，如果需要，也可采用更大的或较小的瓶子。当采用150毫升的瓶子时，则每瓶装50毫升琼脂，并在121℃的压热器中加热杀菌20分钟，热杀菌后，把瓶子斜放以获得最大的琼脂表面。    每瓶接入2毫升经加热的孢子悬液，其制备法如上所述。然后把每个瓶子前前后后地倾斜，直至接种物覆盖全表面。接种过的瓶子在适当温度下保温培养，直至生长与发芽完成(保温培养时，瓶子斜放成大约40。角，以便过量的接种物与冷凝水集中于瓶底)。