杆菌在液体培养基中培养实验分析显微镜

杆菌在液体培养基中培养实验分析显微镜
掌握最新的DNA操作技术需要熟悉一些相关的基本概念和实验技巧。本章着重介绍了大肠杆菌以及用于将DNA引入细菌的质粒和噬菌体等载体的生物学特性和操作方法，并由此提供了一些基本概念和实验技巧。    大肠杆菌是含有长约3000 kb左右的环状染色体的棒状细菌。它能在仅含碳水化合物如葡萄糖(提供碳源和能量)和提供氮、磷和微量元素的无机盐的极限培养基上快速生长。然而，如果用含氨基酸、核苷酸前体、维生素以及其他一些细胞不能合成的代谢成分的丰富培养基来培养，那么大肠杆菌的生长会更快。    当大肠杆菌在液体培养基中培养时，其开始裂殖前，先进入一个生长滞后期。在丰富培养基中，它能在20～30min内复制一代，这种指数生长相称之为对数期。最后，当培养基中的营养成分和氧耗尽或当培养基中废物的含量达到抑制细菌的快速生长的浓度时，菌体密度就达到一个比较恒定的值。    除了极少数的例外，大多数应用于DNA重组技术的细菌是大肠杆菌K一12株的衍生菌株。许多分子生物学研究进展均得益于对这个菌株以及以这个菌株为宿主菌的噬菌体和质粒所进行的研究；而且现在应用的很多克隆技术也都得益于这个时期的研究成果。    在克隆方案中经常使用细菌质粒。在天然的大肠杆菌分离株中可含有_些自主复制、环状的染色体外DNA分子，它们具有重要的生物学功能如抗生素抗性和产生限制性酶。