大多数绿色菜叶的色谱图上会显示出类胡萝卜素
2020-03-06 11:539110厂家库小编WEX
大多数绿色菜叶的色谱图上会显示出类胡萝卜素
步骤:色素的色谱分离 (1)制备展开剂。取lmL正丁醇到lOOmL容量瓶中,并用石油醚定容,摇匀。注意:远离火源。 (2)向15em的试管中倒上述展开剂约1.3cm,用软木塞塞住。 (3)将Whatman 1号滤纸剪成15cm长1.3cm宽的长条。在长条一端1.3cm处折出一条横线,用铅笔在横线中心及长条另一端1.3cm处的中心各点一点。 (4)用微型移液管或毛细管向滤纸条上做标记的点的位置滴一小滴色素的石油醚提取物,点样量要足够小,直径在0.5cm内。在相同的点上重复点样4~8次,每次点完后干燥几秒钟,让溶剂充分挥发,然后再点样。可以先用碎滤纸片进行训练。 (5)用一个大头针将滤纸条从褶缝中心的点钉在木塞底部,确保滤纸条要垂直悬挂。 (6)将滤纸条放入装有展开剂的试管中。展开剂要接触到滤纸条顶端,但要低于点样处。 (7)让展开剂向上展开,直到色素分离。 (8)大多数绿色菜叶的色谱图上会显示出类胡萝卜素(它会随着展开剂的前沿推移,距离底部最远)。蓝绿色的叶绿素a比橄榄绿的叶绿素b距离滤纸底部远(即叶绿素a展开更快),在叶绿素a前面可能会观察到脱镁叶绿素a的灰色带。色谱图上可能还会显示出黄色的叶黄素的点或带。 (9)画出色谱图,并将各点标记出来。薄层色谱 作为一种替代纸层析色谱的方法,薄层色谱可用于分离菠菜色素。在距离硅胶板的底部约1.5cm处点L含菠菜色素的石油醚提取物,点样直径在l cm以内。 当点样点彻底干燥后,将硅胶板放入含有溶剂(石油醚一异丙醇一水,100:5:0.25,体积比)的层析缸中。该溶剂的制备方法是:将异丙醇加入水中,混合后再加入石油醚。溶剂的深度一定要低于点样点的位置:当溶剂前沿展开至离点样点约15cm时,从层析缸中移出硅胶板,干燥硅胶板: 鉴别尽可能多的色素。