用相差显微镜观察根尖细胞样品-解剖显微镜制备

用相差显微镜观察根尖细胞样品-解剖显微镜制备
根尖压片制备染色体样品    所有步骤均在解剖显微镜下进行。操作程序    1．根据不同材料的根尖大小，从1—3个根上切下根尖。    2．将根尖放在Vectabond处理过的载玻片上，去掉根冠。    3．对于小根尖，加10μL45％乙酸，用“挤压针”挤压根尖，直到释放出分生组织    细胞。对于大根尖，可纵向剖开，用一个小解剖刀将分生组织刮到10-20吐    45％乙酸中。然后象上面那样挤压分生组织。    4．用皮下注射针或尖头镊子除去碎片(不要让细胞干燥)。    5．用皮下注射针头搅拌细胞悬液，并用45％乙酸调整体积至10—15社。    6．将准备好的盖玻片盖在细胞悬液上。    7．用滤纸条吸掉多余液体。    8．迅速地将载玻片在火焰上过1—2次。不要过热——载玻片不应热到拿不住    的程度。    9．在盖玻片上放上滤纸，轻轻挤压。    Ⅱ0．用相差显微镜观察细胞，重复步骤8-9，直至细胞分散度合适。    11．记下分散良好的中期细胞的坐标，并用金刚钻笔在盖玻片上标记位置。    12．将载玻片浸入液氮中(用夹钳)速冻，或者盖玻片向上在干冰块上放置至少5    min。    13．用解剖刀快速掀掉盖玻片，立即将载玻片浸入96％乙醇中，至少5s。    14．在空气中干燥。将载玻片放人装有一袋硅胶的密封的塑料玻片盒中，—20    ℃保存。