微生物数目生长也可以用直接显微镜计数

微生物数目生长也可以用直接显微镜计数
直接显微计数法    细菌生长也可以用直接显微计数法(direct micro—scopic counts)测定。该法首先将一定体积的微生物培养液加到经特殊校准的蚀刻载玻片上，即Petroff-Hausser计数板。用一支校准的移液管将细菌悬浮液加到计数室内。细菌沉淀且液体流动缓慢后，对特定校准区域内的微生物进行计数。单位体积初始菌悬液中微生物的数目可由一个合适公式计算。每毫升培养液中的细菌数目可以以合理的准确度估测。直接显微计数法的准确度是建立在每毫升培养液所含细菌数目大于一千万个。这是因为只有当大量细胞存在时计数槽的计数结果才可能准确。当然，还需要细菌是均匀散布在培养液中。该技术的缺点是一般无法分辨死细胞和活细胞。
最大可能数法    一些样品所含微生物数目太少，若采用标准平板计数法则无法测得准确的结果。如在食品和水卫生检查或当微生物不能在琼脂上生长时，可采用最大可能数法(most probable number，MPN)。技术人员通过观察样品，估计样品中的细胞数，制备成一系列稀释系数逐渐加大的稀释液。稀释系数增大时，就会出现某些试管中只含有一个菌体而其他管中没有菌体的状况。典型的MPN测定是对一个稀释度取3个体积(10mL，1mL，0．1mL)，每种体积做5支试管(图6．10)。经过培养，仅有一个菌体的试管会产生气泡和或变混浊等生长现象。查对最大可能数表可以获得原培养液中菌体浓度的估计值。该表的数值是根据统计概率得出的，表示原培养液中菌体数有95％的可能性落在特定区间内。